【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

采样的要求 ：1、严格遵守样品采集的操作规程。
2、所采样品必须具有代表性。
3、采样操作要防止污染，防止变质、损坏、丢失。
4、不得加入防腐剂、固定剂等。  
5、样品采集和现场测定必须有二人以上参加 。

食品微生物检验的采样方法
国际食品微生物规格委员会（ICMSF）取样方案；
美国食品和药物管理局（FDA）的取样方案；
世界粮农组织（FAO）取样方案；
我国的食品取样方案。
原则： 能采取完整包装的样品就不拆开取样，必须拆开包装取样的应按无菌操作进行取样.
)液体样品采样方法
生产工序监测采样：车间空气采样：将5个直径90mm的普通琼脂平板分别置于车间的四角和中部，打开平皿盖5min，然后盖盖送检。

食物中毒微生物检验的取样
可疑中毒源食品餐具
病人的呕吐物
粪便或血液
粪便或血液
人畜共患病原微生物检验的取样

当怀疑某一动物产品可能带来人畜共患病病原体时，应结合畜禽传染病学的基础知识，采取病原体最集中、最易检出的组织或体液送检验室检验。


一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

1．取经37℃培养18-24小时，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、铜绿假单胞菌 10104肉汤培养物、 生孢梭菌 64941硫乙醇酸盐培养物1ml+9ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml，做活菌计数备用 2．取经25℃ 培养18~24小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml+9 ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-6为50~100个/ml，做活菌计数备用 3．取经25℃ 培养1周的黑曲霉菌斜面培养物，加3~5ml盐水洗下霉菌孢子，吸取出菌液， 用标准比浊管比浊，与浊度相当后，取1 ml +9 ml盐水=10-1，逐管10倍稀释为10-4约50~100个/ ml，做活菌计数备用

结果判断：供试品组的菌回收率、稀释剂对照组的菌回收率。 试验组的菌回收率=[（试验组平均菌落数–供试品对照组平均菌落数）/菌液组平均菌落数 ]×100% 稀释剂对照组的菌回收率=[（稀释剂对照组的平均菌落数/菌液组的平均菌落数）]×100% ●判断标准: 菌回收率均不低70% 。

试验菌株：按规定检查的控制菌选择相应验证的菌株。 ●阴性对照菌株:设立阴性对照菌是为了验证该控制菌检查方法的专属性。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌用大肠埃希菌；大肠埃希菌、沙门菌、大肠菌群用金黄色葡萄球菌。 ●菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。 ●菌液制备:10～100cfu/ml。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

建立一个无菌取样的分析清单 ，按清单准备工具、容器、设施（衣服、发网等）； 盛样品的容器应当被预先标识，如样品号、取样日期、取样人等； 检查所有取样设施、工具和容器的灭菌日期、灭菌时间，并做好标识； 准备好所用的各种试剂，做好普通营养琼脂或其他选择必培养基； 注意干冰或湿冰的准备及保存。

大样：整批检验 中样：采样员从大样各部分取得的混合样（250克） 小样：检验员用来检验的样品（一般为25克）。 表面污染：50cm2 （5cm 2×10处） 罐头食品：罐/批、班次 一般每个品种>3罐，可以以每配料罐或灭菌锅为一批。

五、微生物检验员证书相关

1、瓶装液体样品的处理 :用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开； 含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样25mL检验。

2、盒装或软塑料包装样品的处理 :将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布在剪开部分，直接吸取样品25mL ，或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。

固体样品的处理：1、捣碎均质法 ;将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。

剪碎振摇法:将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。

研磨法 :将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。

整粒振摇法 :直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。

使用注意事项 不同的分析方法对试剂有不同的要求，因不同等级的试剂价格往往相差很远，纯度越高价格越贵。不同等级试剂选择不当，会造成资金浪费或影响化验结果。 化验员应熟知试剂的性质（如市售酸碱的浓度，试剂在水中的溶解度，有机溶剂的沸点、燃点，试剂的腐蚀性、毒性、爆炸性等）。 保护包装瓶上的标识，分装或配制试剂后应立即粘标签。决不可在瓶中装与标签不符的物质。无标签的试剂可取小样检定，不能用的要慎重处理，不应乱倒。 一般溶液的标识：溶液名称、溶液浓度、配置人、配置日期。 标准溶液的标识：标准溶液名称、浓度、标定人、标定日期、有效期。 取样：固体用洁净药勺从试剂瓶中取出，决不可用手抓取；液体可用洁净量筒倒取，不要用吸管伸入原瓶试剂吸取；取出的试剂不可倒回原瓶。 打开易挥发试剂时，不可把瓶口对准自己脸部或别人。化学试剂不可舌头品尝，一般不能作为药用或食用。 不可用鼻子对准试剂瓶猛吸气，用手在试剂瓶上方扇动，闻气味。

标准滴定溶液制备的一般规定见GB603-2002。 标准滴定溶液：精确知道浓度的溶液。 滴定：将标准 加入到待测元素的溶液中的操作。 标定：测定标准溶液准确浓度的操作。 配制过程中所需的水必须是蒸镏水或纯净水。 药品标识

国际食品微生物专业委员会:国际食品微生物专业委员会

采样基本原则 （1）各种微生物本身对人的危害程度各有不同。 （2）食品经不同条件处理后，其危害度变化情况：①降低危害度；②危害度未变；③增加危害度。 根据（1）（2）的情况来设定抽样方案并规定其不同采样数。

n：系指一批产品采样个数。  c：系指该批产品的检样菌数中，超过限量的检样数，即结果超过合格菌数限量的最大允许数。  m：系指合格菌数限量，将可接受与不可接受的数量区别开。  M：系指附加条件，判定为合格的菌数限量，表示边缘的可接受数与边缘的不可接受数之间的界限。

二级法只设有n、с及m值 以其一点作为食品微生物的限量值，只设合格判定标准m值，超过m值的，则为不合格品。 以生食海产品鱼为例 n=5，c=0，m=102， （n=5即抽样5个，c=0即意味着在该批检样中，未见到有超过m值的检样，此批货物为合格品)。 在中等或严重危害的情况下使用二级抽样方案

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/10/26 8:42:58