【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

收样： 1、收到样品后逐一核对验收，登记编号 如2004年收到的50号样品，编号可写成：20040050 2、立即将样品放在冰箱或冰盒中，并积极做好准备工作。

(一)检验:1、选择检验方法：
国内：国家标准
国外：
       国际标准：如FAO标准、WHO标准；
       每个进口国的标准：如美国FDA标准、日本厚生省标准、欧共体标准等

检验:检验项目
制备稀释好的检样，按不同的检验项目及时进行检验。
菌落总数
大肠菌群
致病菌的检验
肠道致病菌检验
致病性球菌检验
检验要求 :（1）按标准操作规程进行检验操作，边工作边做原始记录。 （2）检测结束，连同结果一起交同条线技术人员复核。复核过程中发现错误，复核人应通知检测人更正，然后重新复核。 （3）检测人和复核人在原始记录上签名，并编写"检测报告底稿"。 （4）所有检测项目完成后，检测人员将原始记录、样品卡、报告书底稿交科主任作全面校核。
(二) 报告 :
经审核后的报告底稿、样品卡、原始记录，上交打印正式报告二份 。 将报告正本交审核人及批准人签名，并在报告书上盖上"检验专用章"CMA章和中心公章后对外发文。 收文科室或收文人要在检测申请书上收件人一栏内签字，以示收到该报告的正式文本。 在报告正式文本发出前，任何有关检测的数据、结果、原始记录都不得外传，否则作为违反保密制度论处。 



一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

b、禽类（包括家禽和野禽） 鲜、冻家禽采取整只，放无菌容器内；带毛野禽可放清洁容器内，立即送检。 c、各类熟肉制品 包括酱卤肉、肴肉、方圆腿、熟灌肠、熏烤肉、肉松、肉脯、肉干等，一般采取200g，熟禽采取整只，均放无菌容器内，立即送检。 d、腊肠、香肚等生灌肠 采取整根、整只，小型的可采数根、数只，其总量不少于250g。

检样的处理 a、生肉及脏器检样的处理 先将检样进行表面消毒（在沸水内烫3s~5s，或灼烧消毒），再用无菌剪剪取检样深层肌肉25g，放入无菌乳钵内用灭菌剪剪碎后，加灭菌海砂或玻璃砂或玻璃砂研磨，磨碎后加入灭菌水225mL，混匀后即为1:10稀释液。 b、鲜、冻家禽检样的处理 先将检样进行表面消毒，用灭菌剪或刀去皮后，剪取肌肉25g（一般可从胸部或腿部剪取），以下处理同生肉。带毛野禽去毛后，同家禽检样处理。

棉拭采样法和检样处理 一般用板孔5cm2的金属制规板，压在受检物上，将灭菌棉拭稍沾湿，在板孔5cm2的范围内揩抹多次，然后将板孔规板移压另一点，用另一棉拭揩抹，如此共移压揩抹10次，总面积50cm2。每支棉拭在揩抹完毕后立即剪断或烧断后投入盛50ml灭菌水的三角瓶或大试管中，立即送检。检验时充分振摇瓶、管中液体，作为原液，再作10倍递增稀释。 检验致病菌，不必用规板，在可疑部位用棉拭揩抹即可。 4、检验方法 见菌落总数、大肠菌群测定及有关致病菌和霉菌的检验。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

样品的保存:样品到实验室后应在36h内检验（贝类是6h）。 进行必要和清晰的标识：样品名称、样品描述、样品批号、企业名称和地址、取样人、时间、地点、温度和测试目的。 样品在保存过程中采用适当的方法，取保样品和微生物的状态，仍能代表取样时的特性。（特别需要注意温度、pH值、氧气等条件变化） 对样品的贮存过程应有记录。

样品的处理方法 :是指对采取的样品的分取、粉碎及混匀等过程，以保证样品的均匀性，在检验时能具有代表性。 液体样品 固体样品 冷冻样品

液体样品的处理:1.瓶装液体样品的处理 2.盒装或软塑料包装样品的处理 3.半固体或粘性液体食品

瓶装液体样品的处理 :先摇匀-表面消毒-用无菌工具开罐-吸样（>2.5cm深度） 用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开； 含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样25mL检验； 酸性饮料：pH<4.5 用灭菌的10%Na2CO3调至中性。

2.盒装或软塑料包装样品的处理: 将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布在剪开部分，直接吸取样品25mL ，或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。

五、微生物检验员证书相关

工人手 被检人五指并拢，用一浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。

采样标签的填写:对采样前后的大、中、小样均要进行标识，注明：编号、品名、来源、批号、数量、时间、采样人姓名、采样条件，并填写记录表格。 盛样容器必须有和样品一致的标记，并确保标记牢固并防水。 

洗涤方法 洗涤玻璃仪器的方法很多，应根据试验的要求、污物的性质和污染的程度来选用。 需准确量取溶液的量器，清洗时不易使用毛刷，因长时间使用毛刷，容易磨损量器内壁，使量取的物质不准确。 玻璃器皿洁净度检查：内壁应完全被水润湿而不挂水珠

清洗方法： 用水刷洗 用合成洗涤剂洗或肥皂液洗 用铬酸洗液（20g重铬酸钾溶于加热搅拌的40g水中，再慢慢加入360g工业浓盐酸）：对有机物的油污去处能力强，但其腐蚀性强、有一定毒性，使用应注意安全。 其他洗涤液 碱性高锰酸钾洗液：4g高锰酸钾溶于水中，加入10g氢氧化钾，用水稀释 至100ml。用于清洗油污或其它有机物质。 草酸洗液：5-10g草酸溶于100ml水中，加入少量浓盐酸。此溶液用于洗涤高锰酸钾洗后产生的二氧化锰。 碘－碘化钾洗液（1g碘和2g碘化钾溶于水，用水稀释至100ml）：用于洗涤硝酸银黑褐色残留污物。 纯酸洗液：1:1的盐酸或硝酸。用于除去微量离子。 碱性洗液：10％氢氧化钠水溶液。加热使用去油效果较好。 有机溶剂（乙醚、乙醇、苯、丙酮）：用于洗去油污或溶于该溶剂的有机物。

干燥 晾干：不急用的可倒置自然干燥。 烘干：可用105-120℃烘箱烘干（量器不可在烘箱烘干）。 吹干：急于干燥的可用热风吹干（玻璃仪器烘干机）。

酸度
原理：用0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液滴定一定量的样品，以酚酞为指示剂，滴定至终点。将滴定所消耗的氢氧化钠溶液的体积乘以相应的系数，获得样品的滴定酸度。
注意事项
滴定管先润洗，滴定前滴定管要排尽气泡。
配置完的氢氧化钠标准滴定溶液需标定出实际浓度。
操作需连续进行（滴定时再加无二氧化碳蒸馏水和酚酞）。
滴定后保持30s不变色再读数。
滴定终点应与标准色对比，以减少系统误差。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/30 16:06:34