【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

化验室常用检测设备：阿贝折光仪

使用方法 仪器安装：安放在光亮处，应避免阳光的直接照射，以免液体试样受热迅速蒸发，检查棱镜上温度计读数是否符合要求（一般选用20±0.1℃或25±0.1℃）； 加样：旋开测量棱镜和辅助棱镜的闭合旋钮，使辅助棱镜的磨砂斜面处于水平位置，若棱镜表面不清洁，可滴加少量丙酮，用擦镜纸顺单一方向轻擦镜面。待镜面干净后用滴管滴加数滴试样于辅助棱镜的毛镜面上，迅速合上辅助棱镜； 调光：转动镜筒使之垂直，调节反射镜使射光进入棱镜，同时调节目镜的焦距，使目镜中十字线清晰明亮，调节消色散补偿器使目镜中彩色光带消失，再调节读数螺旋，使明暗的界面恰好同十字线交叉处重合； 读数：常用的阿贝折光仪可读至小数点后的第四位，为了使读数准确，一般应将试样重复测量三次，每次相差不能超过0.0002，然后取平均值。

注意事项 注意保护棱镜，清洗时只能用擦镜纸而不能用滤纸等，加样时不能将滴管口触及镜面，对于酸碱等腐蚀性液体不能使用阿贝折光仪； 每次测定时，试样不恩能够加的太多，一般只需加2-3滴即可； 注意保持仪器的清洁，保护刻度盘，每次试验完毕，要在镜面上加几滴丙酮，并用擦镜纸擦干； 读数时，有时在目镜中观察不到清晰的明暗分界线，而是畸形的，这是由于棱镜间未充满液体；若出现弧形光环，则可能是由于光线未经过棱镜而直接照射到聚光镜上； 若待测试样折射率不再1.3-1.7范围内，不能够用阿贝折光仪测定，也看不到明暗分界线。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

（一） 检验前准备 ：(1)准备好所需的各种仪器 如冰箱、恒温水浴箱、显微镜等。 (2)各种玻璃仪器 如吸管、平皿、广口瓶、试管等均需刷洗干净(121℃，20min)或干法(160℃一170℃，2h)灭菌，冷却后送无菌室备用。 (3)准备好实验所需的各种试剂、药品 做好普通琼脂培养基或其他选择性培养基，根据需要分装试管或灭菌后倾注平板或保存在46℃的水浴中或保存在4℃的冰箱中备用。

(4)无菌室灭菌 如用紫外灯法灭菌，时间不应少于45min，关灯半小时后方可进入工作；如用超净工作台，需提前半小时开机。必要时进行无菌室的空气检验，把琼脂平板暴露在空气中15min，培养后每个平板上不得超过15个菌落。 (5)检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后备用 工作人员进入无菌室后．实验没完成前不得随便出入无菌室。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

奶油 无菌操作打开包装，取适量检样于灭菌三角烧瓶内，450C水浴或温箱中加温溶解，用灭菌吸管取25mL奶油放入含225ml灭菌生理盐水或灭菌奶油稀释液的烧瓶（瓶装稀释液应预置于450C水浴中保温，10倍递增稀释时所用稀释液亦同），振摇均匀，从检样融化到接种完毕时间不应超过30min。 注：奶油稀释液：格林氏液（配法：氯化钠9g、氯化钾0.12g、氯化钙0.24g、碳酸氢钠0.2g、蒸馏水1000ml）250mL、蒸馏水750ml、琼脂1g、加热溶解，分装每瓶225ml，1210C灭菌15min。

奶粉 罐装奶粉的开罐取样法同炼乳，袋装奶粉应用蘸有75%酒精的棉球涂擦消毒袋口，以无菌操作开封取样，称取检样25g，放入装有适量玻璃珠的灭菌三角烧瓶内，将225ml温热的灭菌生理盐水徐徐加入（先用少量生理盐水将奶粉调成糊状，再全部加入，以免奶粉结块），振摇使充分溶解和混匀。

奶酪 先用灭菌刀削去部分表面封蜡，用点燃的酒精棉球消毒表面，然后用灭菌刀切开奶酪，以无菌操作切取表层和深层检样各少许，置于灭菌乳钵内切碎，加入少量生理盐水研成糊状

五、微生物检验员证书相关

3.半固体或粘性液体食品 : 融化（45℃水浴），小于15min，取样。

固体样品的处理 :捣碎均质法 ：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。

剪碎振摇法 ：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。
研磨法：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。
整粒振摇法：有完整自然保护膜的颖粒状样品(如蒜瓣、青豆等)，直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。
胃蠕动均质法：这是国外使用的一种新型的均质样品的方法，将一定量的样品和稀释液放入无菌均质袋中，开机均质。均质器有一个长方形金属盒，其旁安有金属叶板，可打击塑树袋，金属板由恒速马达带动，作前后移动而撞碎样品。。

注意事项 复合电极严禁沾污，如沾污可用脱脂棉轻擦或用盐酸清洗； 在标定过程中，每次插入溶液前电极都要清洗干净，并用滤纸吸去电极上的水份。 注意保护电极头部被损坏，用完，套好电极头帽。 使用时，避免机身流入液体，损坏元件。 检测PH值小于7的样品用4和7校准液进行校准，PH值大于7的样品用7和9校准液进行校准 读数时等PH值稳定后再读数 PH计使用后电极用蒸馏水浸泡 及时补充饱和氯化钾


生产工序监测采样 :车间用水：采用带有防尘磨口瓶塞的广口瓶。取样时应先用流水处理出水口，再消毒出水口，才能取样；若怀疑出水口的卫生状况，可以连带取样。取样时避免用手接触水样或取样瓶内部。对于用氯气处理过的水，取样后在每100mL水样中加入0.1mL的2％硫代硫酸钠(?)。

表面取样：通过惰性载体将表面样品上的微生物转移到合适的培养基中进行微生物检测。适应于菌体数量较少的样品。载体包括清水、拭子、胶带等，其它有琼脂肠、影印盘、触片法、表面切片法等.

工作台：将经灭菌的内径为5cm×5cm的灭菌规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/10/14 12:16:52